細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來(lái)說(shuō)，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)必不可少的過(guò)程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺 ?br>
細(xì)胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細(xì)胞膜，模擬體內(nèi)生存環(huán)境，在無(wú)菌、適當(dāng)溫度及酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件下，使其生長(zhǎng)繁殖并維持結(jié)構(gòu)和功能的一種培養(yǎng)技術(shù)。目前細(xì)胞培養(yǎng)方式主要包括以下三種：
1、貼壁培養(yǎng)
貼壁培養(yǎng)主要適用于貼壁依賴性細(xì)胞。此類需要相互依賴，需貼附于不起化學(xué)作用的物質(zhì)（玻璃或塑料等無(wú)活性物質(zhì)）的表面生長(zhǎng)、生存和維持，并終在附著面生長(zhǎng)至單層，鋪滿平面時(shí)便會(huì)發(fā)生接觸抑制。大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞，包括非淋巴組織的細(xì)胞和許多異倍體體系的細(xì)胞屬于這一類型，他們需要附著于適量正電荷的固體或半固體的表面勝仗。
2、懸浮培養(yǎng)
來(lái)源于血液、淋巴組織的細(xì)胞，及許多腫瘤細(xì)胞（包括雜交瘤細(xì)胞）和某些轉(zhuǎn)化細(xì)胞等屬于懸浮培養(yǎng)型細(xì)胞，細(xì)胞為非貼壁依賴性細(xì)胞，無(wú)需支撐面，細(xì)胞或細(xì)胞聚集體懸浮于液體培養(yǎng)基中增殖。懸浮培養(yǎng)是大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的理想方式，可采用類似于微生物的方法進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。
3、固定化培養(yǎng)
動(dòng)物細(xì)胞較微生物脆弱，易受剪切力等的影響，而細(xì)胞固定化技術(shù)可較好的保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械力及環(huán)境變化的影響，提高細(xì)胞的耐受力，促使細(xì)胞高密度培養(yǎng)，提高目的產(chǎn)物的產(chǎn)率。在傳統(tǒng)的固定化酶技術(shù)中，常采用戊2醛、聚丙烯酰胺、聚氨酯等作為固定化細(xì)胞載體。但在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，一般使用較溫和的固定方法，如吸附、包埋、中空纖維或膠囊化等，具有剪切力低、傳遞效果好和抗污染能力強(qiáng)、細(xì)胞生長(zhǎng)密度高、產(chǎn)物易于收集和分離純化等特點(diǎn)。
由于所培養(yǎng)的細(xì)胞的不同，固定化培養(yǎng)的方式也有不同，一般對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞通常采用膠原包埋，而對(duì)于非貼壁依賴性細(xì)胞則常用海藻酸鈣包埋。常用的細(xì)胞固定化的方法主要有吸附、共價(jià)貼附、離子/共價(jià)交聯(lián)、包埋和微囊化等。
防止細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)污染的方法如下：
1、從培養(yǎng)箱取放細(xì)胞前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開(kāi)門(mén)時(shí)間和減少開(kāi)門(mén)次數(shù)。培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發(fā)后再放入，以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過(guò)多乙醇蒸氣。
2、操作的時(shí)候防護(hù)服、口罩、手套缺一不可。操作前，準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)所需物品，以減少走動(dòng)，物品需有序擺放在超凈臺(tái)觸手可及的地方，同時(shí)空留足夠操作空間。
3、操作時(shí)，試劑不用盡量及時(shí)蓋上蓋子，移至操作區(qū)外圍，盡量不要從開(kāi)口容器上經(jīng)過(guò)。
4、使用移液槍時(shí)，將容器傾斜以便于移液，切勿將槍桿碰觸瓶口及內(nèi)壁。一旦發(fā)生倒吸情況，要及時(shí)用酒精棉球擦拭，以免液體殘留導(dǎo)致細(xì)菌滋生。
5、凍存細(xì)胞時(shí)凍存管蓋子需擰緊。復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，從液氮罐取出凍存管，輕擰蓋子，以確認(rèn)蓋子是否擰緊。
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