通常生化試劑盒可分為液體單試劑和液體雙試劑,前者特別適用于半自動(dòng)生化分析儀和小型自動(dòng)生化分析儀,使用方便,缺點(diǎn)是穩(wěn)定性較差。與單試劑相比,雙試劑提高了抗干擾能力,具有穩(wěn)定性能較好,可消除樣品自身空白等特點(diǎn)。此外還有多項(xiàng)同測(cè)組合試劑、濃縮試劑等。
生化試劑盒選購(gòu)和使用注意事項(xiàng):
1、選購(gòu)試劑盒前請(qǐng)弄清以下問題:
?、?根據(jù)取樣記錄,確認(rèn)樣品情況。主要包括樣品的種類、數(shù)量和樣品保存狀況。
?、?根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)或文獻(xiàn)報(bào)道,確認(rèn)測(cè)定哪些指標(biāo)。測(cè)定指標(biāo)最好是成系列的,這樣便于得出明確結(jié)論,也好發(fā)表文章。
③ 提前了解所在實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備情況,避免因?yàn)閮x器設(shè)備不能滿足,造成試劑盒購(gòu)買后無(wú)法使用。
2、選購(gòu)咨詢:
?、?客戶提供檢測(cè)樣本對(duì)象、研究目的和測(cè)定指標(biāo),我們提供相關(guān)試劑盒的情況和所需儀器設(shè)備以及自備用品清單,確認(rèn)哪些指標(biāo)客戶能夠通過(guò)購(gòu)買我們的試劑盒進(jìn)行測(cè)定。
② 客戶提供樣本情況,包括樣本種類、樣本數(shù)量以及樣本保存狀況,我們計(jì)算所需試劑盒的數(shù)量和報(bào)價(jià),以免錯(cuò)購(gòu)、漏購(gòu)、少購(gòu)或者多購(gòu)。
3、 收到試劑盒后請(qǐng)注意以下事項(xiàng):
?、?收到試劑盒后,檢查外包裝有無(wú)破損,打開試劑盒找到說(shuō)明書,按照說(shuō)明書中對(duì)于試劑種類和狀態(tài)的描述,清點(diǎn)試劑種類和數(shù)量是否正常。
?、?按照說(shuō)明書的要求,把試劑放到對(duì)應(yīng)溫度的冰箱或者冷藏室保存。
?、?收到試劑盒后,請(qǐng)盡快使用。為了保證測(cè)定質(zhì)量,試劑盒開封后一般應(yīng)該在一個(gè)月內(nèi)用完。
4、預(yù)實(shí)驗(yàn)
① 選擇2-3個(gè)預(yù)期差異比較大的樣品。
?、?按照說(shuō)明書配制試劑,包括粉劑和自備試劑。
注意:現(xiàn)配現(xiàn)用的試劑,一定要在檢測(cè)前再配置,避免試劑配制之后放置時(shí)間太久!
?、?嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行稱量、勻漿、離心、取樣、測(cè)定。其中,鑒定樣品要進(jìn)行至少兩次平行測(cè)定,作為技術(shù)重復(fù),反映客戶實(shí)驗(yàn)操作和儀器設(shè)備的重復(fù)性好壞。
?、?分析預(yù)測(cè)定結(jié)果。待預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確認(rèn)無(wú)誤后,再開始正式測(cè)定。
5、正式測(cè)定
?、?預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)誤后,開始正式測(cè)定!
② 實(shí)驗(yàn)時(shí)請(qǐng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書上的操作要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)!
③ 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,分析檢測(cè)數(shù)據(jù)。
RNA提取原理:用Trizol 的溶液提取,將總RNA與 DNA 和蛋白質(zhì)分離。Trizol 是一種酸性溶液,含有硫氰酸胍 (GITC)、苯酚和氯仿。GITC 不可逆地使蛋白質(zhì)和 RNase 變性。隨后進(jìn)行離心。在酸性條件下,總 RNA 保留在上層水相中,而大部分 DNA 和蛋白質(zhì)保留在中間相或下層有機(jī)相中。然后通過(guò)用異丙醇沉淀回收總 RNA。RNase 酶可以通過(guò)加入吡咯碳酸二乙酯 (DEPC) 來(lái)滅活。
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