血鎂濃度檢測試劑盒說明書
微量法 100T/96S
注意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
鎂是多種酶的激活劑,如磷酸酶、肌酸激酶、己糖激酶和羧化酶等。鎂也是組成DNA、RNA及核糖體大分子結(jié)構(gòu)所必需的元素。鎂是維持正常神經(jīng)和肌肉功能的重要元素。血清鎂濃度偏離正常值,與某些腎臟和內(nèi)分泌疾病等相關(guān)。
測定原理:
鎂離子在堿性介質(zhì)中氫氧化成膠體粒子,進一步與達旦黃結(jié)合后呈橘紅色,在一定范圍內(nèi),540nm吸光度與鎂離子濃度成正比。
自備儀器和用品:
可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:液體2mL×1管,4℃保存。
試劑二:液體2mL×1管,4℃保存。
試劑三:液體5mL×1瓶,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)液:液體1mL×1管,0.2 mmol/L鎂標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。
測定操作:
1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到540 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管:取EP管,加入120μL蒸餾水,20μL試劑一,混勻;進入20μL試劑二,混勻;加入40μL試劑三,混勻。靜置5min后于540nm測定吸光度,記為A空白管。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入10μL標(biāo)準(zhǔn)液,110μL蒸餾水,20μL試劑一,混勻;進入20μL試劑二,混勻;加入40μL試劑三,混勻。靜置5min后于540 nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
4. 測定管:加入10μL血清,110μL蒸餾水,20μL試劑一,混勻;進入20μL試劑二,混勻;加入40μL試劑三,混勻。靜置5min后于540 nm測定吸光度,記為A測定管。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
血鎂濃度計算:
血鎂含量(mmol/dL)= [C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)]×V樣總
=0.02×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)液:0.2 mmol/L;V樣總:樣品總體積,1 dL=0.1 L。
注意事項:
1. 該試劑盒使用過程中,應(yīng)盡量避免光照射;
2. 血液采取過程中,宜空腹采血,避免使用枸櫞酸鈉抗凝劑;
3. 紅細胞內(nèi)鎂含量約為血清含量的3倍,應(yīng)避免溶血,并及早將血清分離。
4. 加入試劑三混勻后應(yīng)該在30 min內(nèi)測定吸光度。
5. 最低檢出限為0.1mmol/L。
血鎂濃度檢測試劑盒配方(微量法 100T/96S)
試劑一:取2 mL EP管,加入2mg聚乙烯醇,溶解于2 mL50℃蒸餾水。
試劑二:取2 mL棕色EP管,加入0.4 mg達旦黃,加2 mL蒸餾水充分溶解。
試劑三:取5 mL試劑瓶,加入0.375 g NaOH,加入5mL蒸餾水溶解。
標(biāo)準(zhǔn)液:稱取1 mg MgSO4?7H2O,加蒸餾水4.057 mL充分溶解;取EP管,加入0.2 mL上述溶液,0.8 mL蒸餾水,混勻,即為0.2 mmol/L鎂標(biāo)準(zhǔn)液。